Méthodes de culture de tissus animaux
Voici les méthodes de culture de cellules animales :
Culture cellulaire primaire
Ces cellules sont prélevées directement des tissus et des organes de deux manières : par dissociation mécanique ou chimique, ou par digestion enzymatique. Ces cellules sont stimulées pour se développer dans des récipients en verre ou en plastique appropriés et un milieu approprié est placé pour qu'elles les stimulent. Les scientifiques préfèrent cette méthode car elle est plus représentative des types cellulaires des tissus dont ils ont été prélevés, bien que le taux de croissance soit faible et hétérogène.
Culture cellulaire secondaire
Un échantillon est prélevé sur les cultures cellulaires primaires et cultivé dans un autre milieu. Ils se développent pendant une longue période. Les cultures secondaires sont formées à partir des cultures primaires, qui restent longtemps, contrairement aux cellules des cultures cellulaires primaires, en raison à l'alimentation continue en nutriments à intervalles réguliers.
Les cellules sont transférées vers des cultures secondaires par digestion enzymatique des cellules, suivies d'un lavage et d'une remise en suspension de la quantité requise de cellules dans des tailles appropriées. Certains scientifiques préfèrent les cultures de cellules secondaires car elles sont faciles à cultiver et facilement disponibles. Elles sont largement utilisées dans la recherche virale. et la recherche immunologique.
Lignées de croissance cellulaire
Les types de cellules sont divisés en fonction de l'âge de la cellule transplantée en deux types, qui sont les suivants :
- LIGNÉES CELLULAIRES LIMITÉES
Ces lignées cellulaires sont dites limitées car elles contiennent un nombre limité de cellules et les cellules se développent en lignées limitées. Les cellules se développent lentement, en prenant de 24 à 96 heures. Ces cellules se caractérisent par le fait que leur croissance cellulaire n'est pas dense.
- Lignées cellulaires non sélectionnées
Elles sont obtenues à partir de lignées cellulaires transformées in vitro ou de cellules cancéreuses. Ce sont des lignées non spécifiques et peuvent être cultivées en monocouche ou en suspension. Ces cellules se divisent rapidement, en 12 à 14 heures, et peuvent être cultivées indéfiniment. peut présenter des anomalies : forme des chromosomes ou modification du nombre de chromosomes.
De nos jours, grâce aux progrès de la technologie de culture de cellules animales, un certain nombre de lignées cellulaires ont été développées et sont utilisées pour produire des vaccins, des protéines thérapeutiques, des produits pharmaceutiques et des substances anticancéreuses. Il est préférable d'utiliser des lignées cellulaires capables de se développer dans suspension car ils ont un taux de croissance plus rapide.L'ovaire du hamster chinois est la lignée cellulaire la plus largement utilisée chez les mammifères.
Exigences de croissance
Le milieu utilisé pour la culture cellulaire est très complexe et varie considérablement selon le type de cellules utilisées. Il comprend généralement des acides aminés, des vitamines et des sels pour maintenir la pression osmotique, du glucose et un système tampon bicarbonate pour maintenir le pH entre 7,2 et 7,4. Il contient également des hormones, de l'oxygène et du dioxyde de carbone pour améliorer le taux de croissance cellulaire.
Il est nécessaire d'ajouter une petite quantité de sérum sanguin et d'ajouter plusieurs antibiotiques comme la pénicilline et la streptomycine pour éviter toute contamination bactérienne. La température utilisée varie en fonction du type de cellules. Les cellules de mammifères se développent à 37 degrés Celsius, tandis que les cellules prélevées à froid -Les animaux à sang grandissent à une température de 15 à 26 degrés Celsius.