hayvan doku kültürü yöntemleri
Hayvan hücrelerini büyütmenin yolları şunlardır :
Birincil hücre kültürü
Bu hücreler doğrudan doku ve organlardan mekanik veya kimyasal parçalama olmak üzere iki yolla alınır ve enzimatik sindirim kullanılarak da mümkündür.Bu hücreler uygun cam veya plastik kaplarda büyümeleri için uyarılır ve uyarılmaları için uygun bir ortam yerleştirilir. Bilim insanları, büyüme hızı düşük ve heterojen olmasına rağmen, alındığı dokudaki hücre türlerini daha iyi temsil ettiği için bu yöntemi tercih ediyor.
İkincil hücre kültürü
Primer hücre kültürlerinden örnek alınıp başka bir ortamda kültüre edilirler, çünkü bunlar uzun süre büyürler, böylece primer hücre kültürlerinin hücrelerinden farklı olarak uzun süre kalan primer kültürlerden sekonder kültürler oluşur. Besinlerin düzenli aralıklarla sürekli beslenmesine.
Hücreler, enzimatik sindirim, ardından gerekli miktarda hücrenin uygun hacimlerde yıkanması ve yeniden süspansiyon haline getirilmesiyle ikincil kültürlere aktarılır.Bazı bilim adamları, yetiştirilmesi kolay ve kolayca elde edilebilir oldukları için ikincil hücre kültürlerini tercih ederler.Virolojik olarak yaygın olarak kullanılırlar. ve immünolojik araştırmalar.
hücre büyüme çizgileri
Nakledilen hücrenin yaşına bağlı olarak hücre tipleri aşağıdaki gibi iki türe ayrılır:
- Sınırlı hücre hatları
Bu hücrelerin hatları sınırlı olarak adlandırılır çünkü sınırlı sayıda hücre içerirler ve hücreler sınırlı hatlarda büyürler, burada hücreler yavaş büyür, 24 ila 96 saat sürer. içlerindeki hücreler yoğun değildir.
- Seçilmemiş hücre çizgileri
İn vitro transforme edilmiş hücre hatlarından veya kanser hücrelerinden elde edilirler ve tek tabakalı veya süspansiyon formunda kültürlenebildikleri için spesifik olmayan hatlardır, bu hücreler hızla bölündüklerinden, 12 ila 14 saat sürer ve süresiz olarak kültürlenebildikleri için, bu hücreler çizgiler kromozom şeklinde bozulma veya kromozom sayısında değişiklik gösterebilir.
Günümüzde hayvan hücre kültürü teknolojisindeki gelişmelerle birlikte aşı, tedavi edici protein, farmasötik ürün ve kanser karşıtı malzeme üretiminde kullanılan çok sayıda hücre dizisi geliştirilmiştir. Süspansiyonla büyürler çünkü daha hızlı bir büyüme oranına sahiptirler.Çin hamsteri yumurtalığı, memelilerde en yaygın kullanılan hücre dizisidir.
büyüme gereksinimleri
Hücre kültürü için kullanılan ortam çok karmaşıktır ve kullanılan hücre tipine bağlı olarak büyük ölçüde değişiklik gösterir. Genellikle ozmotik basıncı ve glikozu korumak için amino asitler, vitaminler ve tuzlar ile pH'ı 7,2 arasında tutmak için bikarbonatlar için bir tampon sistemi içerir. ve 7.4.Ayrıca hormon, oksijen ve karbondioksit içerir.Hücre büyüme hızını arttırmak için.
Bakteriyel bulaşmayı önlemek için az miktarda kan serumu eklenmesi ve penisilin , streptomisin gibi birçok antibiyotiğin eklenmesi gerekir ve kullanılan sıcaklık hücre tipine göre değişir.Memeli hücrelerinde 37 santigrat derecede büyürken, hücreler alınır. soğukkanlı hayvanlardan 15 ila 26 santigrat derece sıcaklıkta büyürler.