Metodi di coltura di tessuti animali
Di seguito sono riportati i modi per far crescere le cellule animali :
Coltura cellulare primaria
Queste cellule vengono prelevate direttamente dai tessuti e dagli organi in due modi: disgregazione meccanica o chimica, ed è possibile anche mediante digestione enzimatica.Queste cellule vengono stimolate a crescere in appositi contenitori di vetro o plastica, e viene posto un apposito terreno per la loro stimolazione la loro crescita Gli scienziati preferiscono questo metodo perché è più rappresentativo dei tipi di cellule nel tessuto da cui è stato prelevato, sebbene il tasso di crescita sia basso ed eterogeneo.
Coltura cellulare secondaria
Un campione viene prelevato dalle colture cellulari primarie e coltivato in un altro terreno, poiché crescono per un lungo periodo di tempo, quindi le colture secondarie si formano dalle colture primarie che rimangono per lungo tempo, a differenza delle cellule delle colture cellulari primarie, a causa alla somministrazione continua di sostanze nutritive a intervalli regolari.
Le cellule vengono trasferite alle colture secondarie mediante digestione enzimatica delle cellule, seguita dal lavaggio e dalla risospensione della quantità richiesta di cellule in volumi appropriati.Alcuni scienziati preferiscono le colture cellulari secondarie perché sono facili da coltivare e prontamente disponibili.Sono ampiamente utilizzate in virologia e ricerca immunologica.
linee di crescita cellulare
A seconda dell'età della cellula trapiantata, i tipi di cellule sono divisi in due tipi, come segue:
- Linee cellulari limitate
Le linee di queste cellule sono chiamate limitate perché contengono un numero limitato di cellule e le cellule crescono in linee limitate, dove le cellule crescono lentamente, impiegando dalle 24 alle 96 ore.Queste cellule sono caratterizzate dal fatto che la crescita delle le cellule in esse non sono intense.
- Linee cellulari non selezionate
Sono ottenuti da linee cellulari trasformate in vitro o cellule tumorali e sono linee non specifiche in quanto possono essere coltivate in forma monostrato o sospensione, poiché queste cellule si dividono rapidamente, impiegando da 12 a 14 ore e possono essere coltivate a tempo indeterminato, queste cellule le linee possono mostrare un'interruzione della forma del cromosoma o un cambiamento nel numero di cromosomi.
Al giorno d'oggi, con i progressi nella tecnologia delle colture di cellule animali, sono state sviluppate numerose linee cellulari utilizzate per produrre vaccini, proteine terapeutiche, prodotti farmaceutici e materiali antitumorali.È preferibile utilizzare linee cellulari in grado di crescono per sospensione perché hanno un tasso di crescita più veloce.L'ovaio di criceto cinese è la linea cellulare più utilizzata nei mammiferi.
esigenze di crescita
Il terreno utilizzato per la coltura cellulare è molto complesso e varia notevolmente a seconda del tipo di cellule utilizzate, comprende generalmente aminoacidi, vitamine e sali per mantenere la pressione osmotica e il glucosio e un sistema tampone per i bicarbonati per mantenere un pH compreso tra 7,2 e 7.4 Contiene anche ormoni, ossigeno e anidride carbonica per migliorare il tasso di crescita cellulare.
È necessario aggiungere una piccola quantità di siero di sangue e aggiungere molti antibiotici come penicillina e streptomicina per prevenire la contaminazione batterica e la temperatura utilizzata varia a seconda del tipo di cellule.Nei mammiferi le cellule crescono a 37 gradi Celsius, mentre le cellule prelevate da animali a sangue freddo crescono a una temperatura compresa tra 15 e 26 gradi Celsius.