metody hodowli tkanek zwierzęcych
Oto sposoby hodowli komórek zwierzęcych :
Pierwotna hodowla komórkowa
Komórki te pobierane są bezpośrednio z tkanek i narządów na dwa sposoby: poprzez rozkład mechaniczny lub chemiczny, możliwy jest także poprzez trawienie enzymatyczne.Komórki te pobudza się do wzrostu w odpowiednich pojemnikach szklanych lub plastikowych i umieszcza się dla nich odpowiednią pożywkę w celu stymulacji Naukowcy preferują tę metodę, ponieważ jest ona bardziej reprezentatywna dla typów komórek w tkance, z której została pobrana, chociaż tempo wzrostu jest niskie i niejednorodne.
Wtórna hodowla komórkowa
Próbkę pobiera się z pierwotnych hodowli komórkowych i hoduje na innym podłożu, w miarę jak rosną one przez długi okres czasu, zatem kultury wtórne powstają z pierwotnych kultur, które pozostają przez długi czas, w przeciwieństwie do komórek z pierwotnych hodowli komórkowych, ze względu na do ciągłego podawania składników odżywczych w regularnych odstępach czasu.
Komórki przenosi się do hodowli wtórnych poprzez trawienie enzymatyczne komórek, a następnie przemywanie i ponowne zawieszanie wymaganej ilości komórek w odpowiednich objętościach. Niektórzy naukowcy preferują wtórne hodowle komórkowe, ponieważ są łatwe w uprawie i łatwo dostępne. Są szeroko stosowane w wirusologii i badania immunologiczne.
linie wzrostu komórek
W zależności od wieku przeszczepionej komórki typy komórek dzieli się na dwa typy:
- Ograniczone linie komórkowe
Linie tych komórek nazywane są ograniczonymi, ponieważ zawierają ograniczoną liczbę komórek, a komórki rosną w liniach ograniczonych, w których komórki rosną powoli, trwając od 24 do 96 h. Komórki te charakteryzują się tym, że wzrost komórki w nich nie są intensywne.
- Niewybrane linie komórkowe
Otrzymuje się je z linii komórkowych lub komórek nowotworowych transformowanych in vitro i są to linie niespecyficzne, ponieważ można je hodować w postaci jednowarstwowej lub zawiesinowej, ponieważ komórki te dzielą się szybko, co zajmuje od 12 do 14 godzin i można je hodować w nieskończoność. linie mogą wykazywać zakłócenie kształtu chromosomu lub zmianę liczby chromosomów.
Obecnie, wraz z postępem technologii hodowli komórek zwierzęcych, opracowano wiele linii komórkowych wykorzystywanych do produkcji szczepionek, białek terapeutycznych, produktów farmaceutycznych i materiałów przeciwnowotworowych. Preferowane jest stosowanie linii komórkowych, które są w stanie rosną w zawiesinie, ponieważ mają szybsze tempo wzrostu.Jajnik chomika chińskiego jest najpowszechniej stosowaną linią komórkową u ssaków.
wymagania wzrostu
Pożywka stosowana do hodowli komórkowej jest bardzo złożona i różni się znacznie w zależności od rodzaju użytych komórek.Zazwyczaj zawiera aminokwasy, witaminy i sole w celu utrzymania ciśnienia osmotycznego i glukozy oraz układ buforowy dla wodorowęglanów w celu utrzymania pH pomiędzy 7,2 i 7.4 Zawiera także hormony, tlen i dwutlenek węgla, które poprawiają tempo wzrostu komórek.
Konieczne jest dodanie niewielkiej ilości surowicy krwi oraz dodanie wielu antybiotyków, takich jak penicylina i streptomycyna, aby zapobiec skażeniu bakteryjnemu, a stosowana temperatura różni się w zależności od rodzaju komórek. U ssaków komórki rosną w temperaturze 37 stopni Celsjusza, natomiast komórki pobrane ze zwierząt zmiennocieplnych rosną w temperaturze od 15 do 26 stopni Celsjusza.